活性驗證標準品主要有這五個方法:
第一、縮宮素效價測定
縮宮素效價測定使用的標準品是垂體后葉標準品或合成縮宮素標準品,其活性驗證的原則有兩點:一是標準品溶液應有子宮收縮作用,二是標準品溶液的高、低劑量致子宮收縮作用應有明顯差別。在試驗時要注意,高、低劑量的比值不得超過1:0.7。
第二、降壓物質檢查法
降壓物質檢查所使用的對照品是組胺對照品,其活性驗證方法就是采取該方法規(guī)定的貓靈敏度測定方法。對照品溶液稀釋成0.5μg/ml濃度,按貓體重每lkg注射組胺0.05μg、0.lμg、0.15μg高、中、低三個劑量,共重復給予2~3次,中劑量所致貓血壓下降值應不小于2.67kPa,同時高、中、低三個劑量所致反應昀平均值應有差別,且應是正反應。達到這樣的要求,表明組胺對照品溶液活性驗證符合要求。
第三、肝素生物測定法
肝素生物測定法使用的標準品是肝素標準品,其活性驗證除了要驗證標準品溶液具有抗凝作用外,還應達到不同劑量間抗凝時間有區(qū)別。
以采用血漿試驗為例說明。設標準品管和空白對照管,按藥典規(guī)定的測定方法加血漿、肝素標準品稀釋液(空白對照管加等量的氯化鈉溶液)和氯化鈣溶液,分別混勻,恒溫,觀察并記錄凝結時間。如此操作找出使標準品管平均凝結時間明顯大于空白對照管的標準品稀釋液劑量,為低劑量。然后以上面找出的低劑量濃度為準,按1:0.85左右的劑間比配制標準品高、中劑量濃度,再按藥典規(guī)定的方法測定,試驗設高、中、低和空白對照管,重復3次,低劑量管的血漿凝結時間應大于空白對照管,中劑量管平均凝結時間應大于低劑量管,高劑量管凝平均凝結時間應大于中劑量管,總之應呈正反應。
第四、升壓素生物測定法
升壓素生物測定所使用的標準品也是垂體后葉標準品,其活性驗證可采用上面升壓物質檢查項所述的活性驗證的方法。
第五、升壓物質檢查法
升壓物質檢查所使用的標準品是垂體后葉標準品,其活性驗證可采取該方法規(guī)定的大鼠靈敏度測定方法。標準品溶液配制成0.lμ/ml濃度,低劑量應能使大鼠血壓升高1.33~3.33kPa,且高、低劑量之比約為1:0.6,高劑量所致反應的平均值應大于低劑量所致反應的平均值。達到這樣的要求,表明垂體后葉標準品溶液活性驗證符合要求。
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