細(xì)胞是ELISA實驗的樣本之一,有些老師在收集好細(xì)胞樣本的時候由于各種原因沒能來的及做實驗或者還有遺留的樣本要到下次做,那么就需要把細(xì)胞樣本給凍存起來,現(xiàn)在就讓上海恒遠(yuǎn)來介紹下細(xì)胞凍存的方法:
1.細(xì)胞:選對數(shù)生長期細(xì)胞,收集細(xì)胞24小時前換液一次。
2.計數(shù):按常規(guī)方法把細(xì)胞制成細(xì)胞懸液,計數(shù),令細(xì)胞密度達(dá)5×106/ml,離心去上清,吸入離心管中。
3.凍存液:先用培養(yǎng)液9分+DMSO 1分(或甘油)配成10%的DMSO凍存液,按上法一滴滴加入離心管中,然后用吸管輕輕吹打令細(xì)胞重懸。
4.分裝:分裝入無菌安剖中,每安剖加1.5毫升細(xì)胞懸液。
5.封口:用塑料安剖時擰緊瓶口即可;如用火焰封閉安剖口后,仔細(xì)檢查,定要封嚴(yán),必要時可浸入藍(lán)色液中觀察,為安全起見,把安剖縫入紗布小袋中,以防液氮浸入后,融解時因受熱發(fā)生爆炸傷人;紗袋一端系以線繩,末端扎有小牌,注明:細(xì)胞名稱,凍存日期,以便日后查找。
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