1.選擇培養(yǎng)基沒有一定的標(biāo)準(zhǔn),某種培養(yǎng)基可以適合多種細(xì)胞,某種細(xì)胞也可以在不同培養(yǎng)液中生長(zhǎng).但是,建立某種細(xì)胞株所用的培養(yǎng)基應(yīng)該是培養(yǎng)這種細(xì)胞首選的培養(yǎng)基.可以查閱參考文獻(xiàn),或在購(gòu)買細(xì)胞株時(shí)咨詢.

 

2.1640的確是非常便宜的培養(yǎng)基,也很好用.但是,它的緩沖力zui弱,所以有時(shí)會(huì)對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)有影響,尤其是一些實(shí)驗(yàn)室長(zhǎng)期傳代狀態(tài)不好的細(xì)胞.有條件還是用DMEM培養(yǎng)基.

 

3.一旦在新鮮培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素時(shí),放入4度冰箱.應(yīng)該在2到3周內(nèi)用完它.因?yàn)?一些抗生素和血清中的基本成分在解凍后就開始降解.2-3周后就降解完了.

 

4.培養(yǎng)基的pH值隨著碳酸氫鈉量的增加,呈拋物線增長(zhǎng),當(dāng)碳酸氫鈉加到一定量時(shí),pH變化越來越小.而培養(yǎng)基的滲透壓值隨著碳酸氫鈉量的增加,呈直線增長(zhǎng),碳酸氫鈉量越大,滲培養(yǎng)基變成了高滲溶液,細(xì)胞會(huì)脫水萎suo滴.（ATCC推薦大部分細(xì)胞添加碳酸氫鈉為1.5g/L）

 

5.胎牛血清必須貯存于–20～-70℃,若存放于4℃,2～3周就降解了.可將1瓶500ml的血清,每次40～45ml分裝于無菌50ml離心管中.

 

6.血清的解凍和細(xì)胞的解凍正相反：細(xì)胞是越快越好；血清是越慢越好.血清解凍步驟:-20℃或–70℃冰箱拿出來,放到4℃冰箱,放一天,慢慢融化.

 

7.進(jìn)口的胎牛血清,一般不需要熱滅活,因?yàn)闀?huì)造成沉淀物顯著增多,且會(huì)影響血清的品質(zhì).這些沉淀物在顯微鏡下觀察,像是“小黑點(diǎn)”,常常誤以為是血清遭受污染.

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