對(duì)照品的質(zhì)量直接影響到檢驗(yàn)樣品的結(jié)果。因此,對(duì)照品的標(biāo)化十分重要,中國(guó)藥品生物制品檢定所為此制定了嚴(yán)格的標(biāo)化程序。
首先應(yīng)根據(jù)中國(guó)藥典或衛(wèi)生部標(biāo)準(zhǔn),參考USP,BP,JP等國(guó)外藥典,查閱Merk、Index等資料,確定對(duì)照品的標(biāo)化項(xiàng)目和檢驗(yàn)方法。標(biāo)化內(nèi)容包括:
一、物理常數(shù)的測(cè)定
1.熔點(diǎn):依藥典方法進(jìn)行,取三次測(cè)定的平均值加溫度計(jì)的校正值。熔點(diǎn)現(xiàn)象不易觀察的品種加作DSC熔點(diǎn)測(cè)定。
2.比旋度:按藥典規(guī)定的方法測(cè)定,空白左右分別測(cè)定3次,樣品左右分別測(cè)定5次,計(jì)算甲均值。
3.吸收系數(shù)值:測(cè)定時(shí)要求平行兩份樣品,每份樣品按兩個(gè)濃度(藥典濃度±10%)進(jìn)行測(cè)定。
二、純度考察(標(biāo)準(zhǔn)品)
重點(diǎn)用薄層色譜法和高效液相色譜法兩種方法作“有關(guān)物質(zhì)”檢查:
1.薄層色譜法:要求兩個(gè)展開系統(tǒng),顯色靈敏度要達(dá)到檢測(cè)量的0.1%-0.2%。對(duì)照液的點(diǎn)樣量為梯度,樣品液的點(diǎn)樣量為藥典量和藥典的加倍量。實(shí)驗(yàn)的結(jié)果要報(bào)出樣品的Rf值、雜質(zhì)的景。當(dāng)雜質(zhì)的量較大時(shí),要用雙向展開的方法確定樣品是否分解。
2.高效液相色譜法:要求兩種流動(dòng)相或不同型號(hào)的兩根柱子,最小檢出量要達(dá)到檢測(cè)量的0.1%,進(jìn)樣量為藥典量和藥典量的加倍量,進(jìn)行二極管陣列檢測(cè)峰純度,用歸一化法或主成分自身稀釋對(duì)照法計(jì)算雜質(zhì)量。
三、含量測(cè)定
要求用兩種方法測(cè)定含量。一般為容量法和色譜法。容量法要求兩人分別測(cè)定3-5份。每人的平行實(shí)驗(yàn)結(jié)果以及兩人的實(shí)驗(yàn)結(jié)果的相對(duì)偏差均應(yīng)小于0.3%。高效液相色譜法需用3種濃度作校正因子,精密度要求RSD小于1.5%。若用分光光度法測(cè)定含量,必須用對(duì)照品法,E值法只能作參考。含量測(cè)定用的化學(xué)對(duì)照品還要求作DSC純度測(cè)定。
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