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甲型流感病毒抗體（Flu A-Ab）ELISA試劑盒

[商品編號]:H110825

[CAS]：無

[英文名稱]：

[分子式]：

[分子量]：[品　　牌]：上海恒遠(yuǎn)

[庫　　存]： 500 個

[數(shù)　　量]：

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產(chǎn)品描述

甲型流感病毒抗體（Flu A-Ab）ELISA試劑盒使用說明書
 
本試劑盒僅供研究使用。
 
規(guī)格：96T
 
使用目的：
本試劑盒用于測定血清、血漿及相關(guān)液體樣本中甲型流感病毒抗體（Flu A-Ab）表達(dá)。
實驗原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測定標(biāo)本中甲型流感病毒抗體（Flu A-Ab）表達(dá)。用純化的抗原包被微孔板，制成固相抗原，可與樣品中甲型流感病毒抗體（Flu A-Ab）相結(jié)合，經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗體和其他成分后再與 HRP 標(biāo)記的抗原結(jié)合，形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗原復(fù)合物， 經(jīng)過徹底洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。用酶標(biāo)儀在 450nm 波長下測定吸光度（OD 值），與 CUTOFF 值相比較， 從而判定標(biāo)本中甲型流感病毒抗體（Flu A-Ab）的存在與否。
試劑盒組成
1
30 倍濃縮洗滌液
20ml×1 瓶
7
終止液
6ml×1 瓶
2
酶標(biāo)試劑
6ml×1 瓶
8
陽性對照
0.5ml×1 瓶
3
酶標(biāo)包被板
12 孔×8 條
9
陰性對照
0.5ml×1 瓶
4
樣品稀釋液
6ml×1 瓶
10
說明書
1 份
5
顯色劑 A 液
6ml×1 瓶
11
封板膜
2 張
6
顯色劑 B 液
6ml×1/瓶
12
密封袋
1 個
標(biāo)本要求
1. 標(biāo)本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2. 不能檢測含 NaN3 的樣品，因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
操作步驟    
   1.編號：將樣品對應(yīng)微孔按序編號，每板應(yīng)設(shè)陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1
孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）
   2.加樣：分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液 40μl，然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，
   3.溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
   4.配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
   5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此重復(fù) 5 次，拍干。
   6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl，空白孔除外。
   7.溫育：操作同 3。
   8.洗滌：操作同 5。
   9.顯色：每孔先加入顯色劑 A50μl，再加入顯色劑 B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色 10分鐘.
   10.終止：每孔加終止液 50μl，終止反應(yīng)（此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
   11.測定：以空白孔調(diào)零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。 測定應(yīng)在加終止液后 15 分鐘以內(nèi)進行。
   
計算和結(jié)果判定：
試驗有效性：陽性對照孔平均值≥1.00; 陰性對照平均值≤0.20 臨界值（CUT OFF）計算：臨界值=陰性對照孔平均值+0.15
陰性判定：樣品 OD 值< 臨界值（CUT OFF）者為甲型流感病毒抗體（Flu A-Ab）陰性陽性判定：樣品 OD 值≥ 臨界值（CUT OFF）者為甲型流感病毒抗體（Flu A-Ab）陽性。
注意事項
1. 操作嚴(yán)格按照說明書進行，本試劑不同批號組分不得混用。
2. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
3. 濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。
4. 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。5．底物請避光保存。
6. 試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)，使用雙波長檢測時，參考波長為 630nm
7. 所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。終止液為 2M 的硫酸，使用時必須注意安全。
保存條件及有效期
1. 試劑盒保存：；2-8℃。
2. 有效期：6 個月

 

  • 文檔名稱

    文檔類型

    文件大小

  • 小鼠酮體（KB）ELISA試劑盒說明書

    (pdf)

    201 KB

    下載

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    (doc)

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    (doc)

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